cellabs 02-019-01說(shuō)明書(shū)

cellabs代理——上海起發(fā)

免疫檢測(cè)試劑盒

包涵體肝炎的反應(yīng)

5 x 96井測(cè)試套件

儲(chǔ)存在2-8攝氏度

目錄

5 x 96孔FAdv-8抗原涂層微孔板

1 x 100mL瓶ELISA稀釋液濃縮液10x（藍(lán)色

解決方案）

7 x 0.08mL標(biāo)準(zhǔn)瓶（平蓋）

1 x 0.3mL小瓶抗雞HRP結(jié)合物（藍(lán)帽）

1瓶250mL洗滌緩沖液濃縮液（20x）

1 x 3.0mL基質(zhì)濃縮物（20x）

1 x 60mL基質(zhì)緩沖液

1 x 30mL停止溶液

方法

準(zhǔn)備所有步驟均在室溫下進(jìn)行。

使用前，確保微量滴定板和所有試劑處于室溫。

以下所示數(shù)量是指使用一塊板所需的數(shù)量。

為了制備ELISA稀釋液，將15 ml濃縮物添加到135 ml蒸餾水中。

為了制備洗滌緩沖液，稀釋25mL或從x20分配瓶中分配一份溶液到500 ml洗滌瓶中，并用蒸餾水填充至刻度。

平板布局：平板上有足夠的空間放置80個(gè)測(cè)試樣品（每個(gè)孔一個(gè)樣品），兩行放置7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)血清樣品（一式兩份）。請(qǐng)參考建議的標(biāo)準(zhǔn)板布局。

1、樣品稀釋?zhuān)簩?0uL樣品加入1mL ELISA稀釋液（1x）中，以1:100的比例稀釋測(cè)試樣品和每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)血清?；旌暇鶆颉ｎA(yù)稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品可在4℃下儲(chǔ)存兩周。

2、樣品添加。向孔中加入50uL每個(gè)稀釋樣品。添加50uL各稀釋標(biāo)準(zhǔn)血清。通過(guò)添加50uL ELISA稀釋液（1x）包括空白孔。建議的平板布局如圖1所示。標(biāo)準(zhǔn)1為非反應(yīng)器（陰性對(duì)照），標(biāo)準(zhǔn)7為高滴定度樣品（陽(yáng)性對(duì)照）。

培養(yǎng)板在室溫下在潮濕容器中培養(yǎng)1小時(shí)。

4、清洗板使用1x清洗緩沖液清洗板三次。如果不使用自動(dòng)洗板機(jī)，輕彈盤(pán)子清空內(nèi)容物，并立即使用清洗瓶清洗水井三次。輕拍干燥實(shí)驗(yàn)室紙巾，去除殘留物。

5、共軛物的稀釋和添加。

將50uL結(jié)合物加入6mL ELISA稀釋液（1x），以1:120的比例稀釋結(jié)合物。混合均勻。向每個(gè)孔中添加50uL稀釋共軛物。

6.按照步驟3進(jìn)行孵化。

7.按照步驟4清洗盤(pán)子。

8.TMB基板的添加。

通過(guò)將0.6 mL濃縮物添加到11.4 mL基質(zhì)緩沖液（足以容納1個(gè)平板）中來(lái)稀釋基質(zhì)濃縮物。混合均勻。向每個(gè)孔中添加100uL基質(zhì)。

9、顯色。

室溫下在黑暗中培養(yǎng)15分鐘。

10、停止反應(yīng)。向每口井中加入50uL停止溶液。

11、閱讀

在450 nm的單波長(zhǎng)或450/620nm的雙波長(zhǎng)下讀取條帶。