涂裝程序
Mebiol ®燒瓶中的細(xì)胞培養(yǎng):
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在無(wú)菌環(huán)境中打開(kāi)包裝,將 10mL 培養(yǎng)基直接加入 Mebiol ®燒瓶中。
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關(guān)閉燒瓶并在冰箱 (2-10 °C) 中放置 3 小時(shí),讓 Mebiol® 吸收培養(yǎng)基。
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定期輕輕搖動(dòng)燒瓶以幫助將 Mebiol® 溶解到培養(yǎng)基中。最多需要一天才能*溶解(保持在低溫下)。
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溶解后,放在冰箱里直到氣泡消失。
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在低溫 (2-10°C) 下將細(xì)胞/組織加入 Mebiol ®并加熱至 37°C,以在 3D 水凝膠環(huán)境中培養(yǎng)細(xì)胞/組織。
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要回收細(xì)胞/組織,請(qǐng)將 Mebiol® 冷卻并用 30-40 mL 冷鹽水或培養(yǎng)基稀釋。這將使其脫離凝膠階段。懸浮細(xì)胞可以通過(guò)離心輕松回收。
24 孔板中的細(xì)胞培養(yǎng):
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按照上面的步驟 1-4。
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在添加細(xì)胞/組織之前,取出所需量的 Mebiol ®并放入冷凍離心管中。將剩余的 Mebiol® 放入冰箱(仍在原瓶中)。
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將大約 10 5 個(gè) 細(xì)胞/mL 加入冷凍的離心管中并在冰上輕輕混合。
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預(yù)熱 24 孔板并將覆蓋的培養(yǎng)基分離至 37°C。
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在每個(gè)孔的中心加入 200 µL 冷的 Mebiol ®懸浮液。確保 Mebiol ®不會(huì)覆蓋孔的整個(gè)底部,以便在后續(xù)步驟中更容易更換覆蓋的培養(yǎng)基。
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在 Mebiol ®懸浮液上覆蓋 400 µL 含有酚紅的加熱培養(yǎng)基。37°C 培養(yǎng)。
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要回收細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)?2-8°C 下冷藏并用 400 µL 冷鹽水或培養(yǎng)基稀釋。這將使 Mebiol ®脫離凝膠相。懸浮細(xì)胞可以通過(guò)離心輕松回收。
請(qǐng)勿重新消毒,以免變質(zhì)。開(kāi)封后及時(shí)添加培養(yǎng)基,冷藏保存,1個(gè)月內(nèi)使用。