帶有 DAPI 的水性非硬化 ibidi 封固培養(yǎng)基非常適合封固需要對細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)染的免疫熒光染色樣品。
它專為與 ibidi µ-Slides 和 µ-Dishes一起使用而設(shè)計(jì)。由于非硬化,帶有 DAPI 的 ibidi 安裝介質(zhì)還有助于在通道 µ-Slides 中安裝樣品。
帶有 DAPI 的 ibidi 封固培養(yǎng)基含有工作濃度的 DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚),這是一種方便的 DNA 結(jié)合熒光染料。這種細(xì)胞核標(biāo)記是一種強(qiáng)大的核/染色體復(fù)染劑,是免疫熒光檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。
當(dāng)與 DNA 結(jié)合時,DAPI 的熒光強(qiáng)度遠(yuǎn)高于在溶液中時的熒光強(qiáng)度。這使得直接熒光顯微鏡和長期存儲使用 ibidi 安裝介質(zhì)和 DAPI 安裝的載玻片成為可能。
DAPI 熒光信號的最大激發(fā)波長為 358 nm,最大發(fā)射波長為 461 nm,與免疫細(xì)胞化學(xué)中其他常用熒光染料(例如,GFP 和具有更長波長的類似染料)的光譜重疊最小。

使用帶有 DAPI 的 ibidi 安裝介質(zhì)安裝后 HeLa 細(xì)胞的 Timlapse 視頻。添加封固劑后,細(xì)胞被直接固定、透化和成像。

成纖維細(xì)胞用 3.7% 多聚甲醛固定,用 0.1% Triton X-100 透化,并用 ibidi 封固培養(yǎng)基和 DAPI 封固。相襯和熒光顯微鏡的疊加,40x 物鏡。