陰性對照對于進(jìn)行全面而有意義的實驗至關(guān)重要??贵w可以以非特異性或不希望的方式與其他分子,尤其是其他蛋白質(zhì)結(jié)合。為了顯示在Western Blot上鑒定特定條帶或在使用抗體的流式細(xì)胞儀中對細(xì)胞表面標(biāo)記物進(jìn)行染色是特異性的,可以使用陰性對照,其不應(yīng)導(dǎo)致相似的條帶圖樣或染色。
同型對照是陰性對照的一種特殊類型,其特征是與進(jìn)行實際實驗時所用的抗體具有相同的Fc區(qū),但在實驗中不應(yīng)結(jié)合抗原的可變區(qū)。Fc區(qū)可以與Fc受體或補(bǔ)體特異性地相互作用。因此,在對細(xì)胞表面標(biāo)記物進(jìn)行染色時,有必要控制該“背景”。這些相互作用甚至可能跨物種。例如,具有小鼠Fc受體的大鼠IgG。因此,在進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)時,傳統(tǒng)上需要各種各樣的同種型對照。另請參閱我們的Fc Silent™產(chǎn)品系列,以獲取針對此問題的實用解決方案。
抗體工程技術(shù)可以生成具有相同“特異性”(即,源自相同原始抗體)的同種型對照的標(biāo)準(zhǔn)化面板,這可以降低實驗的復(fù)雜性。面板得益于我們使用重組生產(chǎn)平臺獲得的可重復(fù)性和純度。
目前,Absolute Antibody提供了來自四種不同抗體的同種型控制面板:抗NP,抗熒光素,抗β半乳糖苷酶(來自大腸桿菌)和一種名為MOPC-21的特異性未知的抗體。所有這些都具有人類,小鼠,大鼠,兔子和倉鼠同種型。
抗β-半乳糖苷酶的重組單克隆抗體。使用具有來自scFv 13R4的可變區(qū)(即特異性)的AbAb重組平臺制造。
目標(biāo)蛋白的UniProt登錄號: P16278
目標(biāo)的替代名稱: beta-gal;酸性β半乳糖苷酶;β半乳糖苷酶1;β-半乳糖苷酶;β-gal; EBP; ELNR1; 半乳糖苷酶beta 1; GLB1; MPS4B
免疫原: β-半乳糖苷酶。
特異性: 13R4識別野生型大腸桿菌β-半乳糖苷酶。
抗體*發(fā)表于: Martineau P,Jones P,WinterG。在細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中高水平表達(dá)抗體片段。分子生物學(xué)雜志 1998年7月3日; 280(1):117-27。 PMID:9653035
發(fā)行 說明:描述了通過四輪隨機(jī)誘變改進(jìn)了親本scFv13抗體,從而優(yōu)化了scFv13R4;選擇scFv13R4是因為它具有在還原性環(huán)境(例如細(xì)胞質(zhì))中正確折疊的能力。