mypols VolcanoCell 2G RT-PCR 2x預(yù)混液
€180,00
該混合物已針對直接電池應(yīng)用進(jìn)行了專門優(yōu)化。
跳過耗時且昂貴的RNA純化。VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix使您能夠直接從細(xì)胞懸液或細(xì)胞裂解物中定量和檢測RNA，而無需純化步驟。只需分離細(xì)胞，將細(xì)胞懸浮液直接添加到RT-PCR反應(yīng)混合物中，放入實時儀器中，然后開始即可。
可選地，使用裂解緩沖液直接在孔或燒瓶中裂解細(xì)胞，只需旋轉(zhuǎn)并直接將上清液添加到RT-PCR混合物中即可。
裂解物也可以冷凍并儲存在-20℃。
跳過逆轉(zhuǎn)錄步驟。不需要等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟。
Volcano2G是一種具有PCR活性的逆轉(zhuǎn)錄酶，非常穩(wěn)定，在95°C下的半衰期> 40分鐘。
當(dāng)添加實時PCR染料時，Volcano2G DNA聚合酶也可用于實時PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結(jié)構(gòu)域，使其也適用于基于水解探針的分析。如此處所示，通過使用基于探針的qPCR分析和零步RT-PCR方案，使用總RNA的10倍稀釋系列檢測了NONO mRNA。
對于細(xì)胞RNA的可靠RT-PCR，樣品制備步驟*。然而，這些步驟費(fèi)力，費(fèi)時并且需要額外的消耗品。使用我們的VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液，您可以用快速便捷的“零步長”方案代替費(fèi)力的RNA制備。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液具有簡化的“零步驟”工作流程，使您可以規(guī)避費(fèi)力的純化和提取步驟，從而節(jié)省了時間和金錢。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x實現(xiàn)了低至單個細(xì)胞的檢測靈敏度。在此示例中，按照VolcanoCell2G協(xié)議從單個隆德人中腦（LUHMES）細(xì)胞中檢測到GAPDH mRNA。
具有更多示例的出版物可以在“出版物”部分中找到。
該試劑盒包含一種經(jīng)過工程改造的，極耐熱的逆轉(zhuǎn)錄酶和組合的DNA聚合酶，包括經(jīng)過特殊優(yōu)化的緩沖液系統(tǒng)，該系統(tǒng)僅需要少量細(xì)胞（100至10.000個細(xì)胞）。試劑盒中還包含一個單獨的50x裂解緩沖液。
包含的Volcano2G DNA聚合酶經(jīng)過多代定向，人工進(jìn)化工程化，在95°C下的半衰期> 40分鐘。它可直接從細(xì)胞懸液或裂解物中進(jìn)行“零步” RT-PCR，而無需等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液包含所有標(biāo)準(zhǔn)實時循環(huán)儀儀器中成功且可靠的RT-PCR所必需的所有組分，并且與常見的RT-PCR檢測方法兼容，例如熒光實時PCR染料或熒光探針。
推薦的擴(kuò)增子大小應(yīng)在60-300 bp之間。?
請注意，必須使用跨外顯子-外顯子連接的引物，以僅將擴(kuò)增限制在mRNA靶標(biāo)上。
通過避免昂貴，費(fèi)時的細(xì)胞裂解或RNA純化，VolcanoCell試劑盒是高通量應(yīng)用，RNAi敲除或基因表達(dá)實驗的理想選擇。預(yù)備2x混合可確?？芍貜?fù)的RT-PCR結(jié)果，顯著減少設(shè)置時間并發(fā)生錯誤的風(fēng)險。只需要添加引物和模板。使用隨附的裂解緩沖液可以輕松制備細(xì)胞裂解液。但是，理想的擴(kuò)增子大小應(yīng)在60-300 bp之間！
存儲：
該產(chǎn)品以涼爽包裝出售。請在抵達(dá)時將產(chǎn)品存放在-20°C下。通過分裝保存，大程度地減少凍融循環(huán)次數(shù)。對于日常使用，我們建議將等分試樣保持在4°C下。
RT-PCR活性： 對HEK細(xì)胞在1x裂解緩沖液中的系列稀釋液進(jìn)行了成功的RT-PCR性能測試。151 bp片段（HPRT1 mRNA）在實時PCR循環(huán)儀中擴(kuò)增，并可視化為單個擴(kuò)增產(chǎn)物。
DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)控Volcano3G DNA聚合酶活性并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。
酶濃度由蛋白質(zhì)特異性染色確定。請通過[email protected]查詢有關(guān)特定批次濃度的更多信息。
裂解緩沖液：將HEK細(xì)胞在1x裂解緩沖液中進(jìn)行系列稀釋，測試其成功的RT-PCR性能。151 bp片段（HPRT1 mRNA）在實時PCR循環(huán)儀中擴(kuò)增，并可視化為單個擴(kuò)增產(chǎn)物。
