Bulldog Bio Inc.是一家混合型組織,結(jié)合了銷售子公司和服務(wù)分銷商的適合品質(zhì)。我們*的營銷,銷售和支持產(chǎn)品線的方法使我們成為年輕公司在復(fù)雜和競爭激烈的美國市場中建立業(yè)務(wù)的理想合作伙伴。無論產(chǎn)品線的技術(shù)復(fù)雜程度如何,我們都專注于建立長期可持續(xù)發(fā)展的業(yè)務(wù)。
bulldog-bio ECFG21說明書
效率顯著高于PEG
我們的新設(shè)備提供通電結(jié)果
試管中體細(xì)胞的自發(fā)融合發(fā)生不到1,000,000次中的1次。雖然如果你是一個有生命的有機體,這是好的,但有時需要將細(xì)胞融合用于特殊應(yīng)用。從歷*看,PEG等化學(xué)物質(zhì)已被用于增加自發(fā)融合2或3個數(shù)量級; 或者,已經(jīng)使用滅活病毒促進(jìn)近端細(xì)胞融合至同等水平。近,利用AC和DC電場的方案進(jìn)一步提高了細(xì)胞融合的效率 - 在某些情況下,多達(dá)25至100倍。
ECFG21采用新的固態(tài)電子設(shè)計,可提供強大的系統(tǒng),并提供大量有用的反饋。兩相技術(shù)依賴于AC場以在鏈形成中端對端地物理對齊細(xì)胞。一旦進(jìn)入它們的物理接觸,系統(tǒng)就會施加一系列DC脈沖來破壞質(zhì)膜并誘導(dǎo)相鄰細(xì)胞的融合。在接下來的30分鐘內(nèi),每百個細(xì)胞中就有一個產(chǎn)生具有兩個細(xì)胞核的活細(xì)胞。原子核隨后融合,過程完成。只有ECFG21才能提供電壓和電流的實時反饋,以確保每個樣品都處于宜的細(xì)胞融合條件下。ECFG21控制AC到DC的切換時間,DC脈沖幅度和長度(包括方便的反極性選項),后融合AC電流用于維持端到端電池配置。它甚至可以手動控制直流脈沖 - 在顯微鏡下觀察細(xì)胞優(yōu)化時非常有用。
對這個新系統(tǒng)的評論是巨大的。據(jù)報道,與化學(xué)和病毒方法相比,ECFG21可以更好地控制實驗條件。這是由于電場反饋; 系統(tǒng)可以實時確定離子條件是否不是融合的宜條件,因為高離子濃度會產(chǎn)生溶液的物理流和細(xì)胞鏈的破壞。電 - 細(xì)胞融合通常產(chǎn)生更穩(wěn)定的雜交細(xì)胞系,部分原因在于電場固有的較低細(xì)胞毒性和該儀器的脈沖控制。結(jié)果往往更具可重復(fù)性和可重復(fù)性。不要忘記人的因素!在Bulldog,我們將與您密切合作,以優(yōu)化您的結(jié)果,我們有多年的經(jīng)驗。
新的研究前景
體細(xì)胞融合是一個棘手的過程,傳統(tǒng)上用于制備單克隆抗體的雜交瘤。這種經(jīng)典技術(shù)將永生性骨髓瘤細(xì)胞系與產(chǎn)生脾的抗體產(chǎn)生B細(xì)胞融合。該雜交瘤細(xì)胞系將穩(wěn)定地產(chǎn)生數(shù)月或數(shù)年的特異性單克隆抗體。細(xì)胞融合也被用于詢問有關(guān)基因表達(dá)和研究癌癥進(jìn)展的基本問題。例如,已經(jīng)將ES / EG細(xì)胞與T細(xì)胞融合以通過重編程多能干細(xì)胞來研究T細(xì)胞活化。該申請還能夠在非宿主細(xì)胞中擴(kuò)增病毒顆粒,或者可以用于研究細(xì)胞如何分裂,并且已經(jīng)被用于融合卵母細(xì)胞和體細(xì)胞的巨大成功。還有許多其他鮮為人知的應(yīng)用,如融合酵母和霉菌細(xì)胞,
Hybridomas表達(dá)了對ECFG21的熱愛
,我們的客戶之一是Precision Antibody,多年來一直致力于開發(fā)基于經(jīng)典PEG方法的高度優(yōu)化的細(xì)胞融合方案。他們的程序?qū)е聻樗麄兊目蛻羯a(chǎn)的抗體。當(dāng)他們要求我們使用ECFG21來解決他們困難的抗原時,我們持謹(jǐn)慎樂觀的態(tài)度。事實上,當(dāng)終結(jié)果統(tǒng)計出來時,每個人都被電融合技術(shù)提供的巨大改進(jìn)所震撼。他們測試了三種不同類別的抗原,以及ECFG21改善其中產(chǎn)生的雜交瘤數(shù)量的能力。此外,他們計算了其中有多少實際上與抗原的反應(yīng)性呈陽性。種是相當(dāng)大的20kDa免疫抑制蛋白,用PEG制備雜交瘤,結(jié)果很好,但是甚至不能產(chǎn)生與抗原反應(yīng)的單個陽性克隆。測試的第二和第三抗原都是短的(分別為8和17個氨基酸)和疏水的。他們再次產(chǎn)生了少量的雜交瘤,但是當(dāng)使用PEG方法時,很少有陽性反應(yīng)性克隆。使用ECFG21得到的雜交瘤數(shù)量為高出25倍至100倍。更令人印象深刻的是,與抗原呈陽性的雜交瘤克隆數(shù)量(這是重要的考慮因素),高出驚人的50倍至200倍以上。如果您的實驗室希望始終如一地生產(chǎn)特異性單克隆抗體,那么ECFG21不僅僅是好的 - 它是您明智的選擇。
體細(xì)胞核移植(SCNT)
ECFG21能夠使用去核卵母細(xì)胞對體細(xì)胞進(jìn)行動物克隆再分泌。
四倍體胚胎互補
參見用于四倍體嵌合體生產(chǎn)的ECFG21,使用兩步克隆程序從癌細(xì)胞產(chǎn)生小鼠。
使用ECFG21的細(xì)胞融合效率比PEG高25-100倍
這三種抗原都被歸類為“難以獲得陽性克隆”。ECFG21在所有情況下都大大增加了克隆數(shù)量,并且至少在一個案例中,當(dāng)傳統(tǒng)PEG方法沒有產(chǎn)生克隆時,導(dǎo)致陽性克隆。
1)使用的抗原:20kDa免疫抑制蛋白,具有高度同源性
2)使用的抗原:疏水性八肽
3)使用的抗原:高度疏水的17個氨基酸肽。
融合/ M: | 每1×10 6個 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的雜交瘤數(shù) |
陽性克隆/ M: | 每1×10 6個 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生針對抗原的單克隆抗體的克隆數(shù) |
E w / P2: | 使用CUY497P2電極進(jìn)行ECFG21電融合(高0.8 mL) |
E w / P8X10: | 使用CUY497P8X10電極進(jìn)行ECFG21電融合(高6.4 mL) |
數(shù)據(jù)由精密抗體副總裁Jun Hayashi博士提供
AC | |
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電壓 | 0 - 80 Vrms |
頻率 | 1 MHz |
持續(xù)時間 | 0-99秒 |
融合后期限 | 0-99秒 |
后融合衰變模式 | 開關(guān) |
在AC / DC之間暫停 | 5微秒 |
直流脈沖 | |
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脈沖波 | 方波 |
電壓 | 1 - 1500 V |
脈沖長度 | 1-99微秒 |
脈沖間隔 | 0.1 - 9.9秒 |
脈沖數(shù) | 0 - 99 |
衰減率 | 0 - 99% |
極性切換 | 開關(guān) |
輸出測量 | |
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電壓 | AC / DC |
當(dāng)前 | AC / DC |
能量(J) | DC |
其他 | |
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阻抗測量 | 0.01 - 50kΩ |
操作模式 | 自動/手動 |
記憶 | 99個節(jié)目 |
電源要求 | AC100-240V 50 / 60Hz |
尺寸 | 386(W)×370(D)×121(H)mm |
重量 | 9公斤 |
保證 | 2年 |